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CRISPR/Cas9基因敲除技術服務 服務編號:SV1501


一. CRISPR/Cas9技術介紹

      CRISPR/Cas9 是一種基于細菌天然免疫機制開發出的基因編輯技術,用于抵御病毒等外來物入侵的一種防御機制。經改造的CRISPR系統主要由Cas9蛋白和單鏈向導RNA(sgRNA)組成,其中sgRNA對靶序列進行特異性識別,Cas9蛋白負責對識別的靶序列進行切割,從而實現DNA的雙鏈斷裂。

      DNA雙鏈斷裂后,細胞對DNA的損傷修復機制就會被激活。目前主要由兩種修復機制,非同源末端連接(NHEJ)修復和同源重組介導的修復(HDR)。沒有外源模板時,機體主要進行NHEJ修復。NHEJ修復過程中,會在切割位點隨機的進行缺失或插入堿基序列,導致DNA移碼突變,從而使基因不能正常表達。存在外源模板的情況下,機體會啟動HDR修復來實現基因的精準插入或者替換。


二.服務內容與流程

服務內容:

Tip: 請您填寫項目申請表,以便Bioss為您提供更好的技術服務。

服務流程:

1. 客戶提供需要敲除的指標信息,與公司商定具體的制備項目、數量和費用,雙方簽訂《委托CRISPR/Cas9基因敲除服務合同》。

2. 雙方確定合作細節,實驗過程中及時反饋實驗進程,并按照規定時間完成委托服務。并向客戶提供委托產品與實驗報告。


三.技術流程

1.RNP轉染法

2.質粒轉染法


四.案例結果展示



五.服務優勢

1. 兩種敲除方法(質粒法和RNP法)可供客戶選擇。

2. 每個靶標設計多條sgRNA,提供多種敲除策略,最大限度的提高的KO效率,提高蛋白水平的敲除概率。

3. 通過Sanger測序后,多種軟件分析編輯效率,提高編輯結果的準確性。

4. 不同的細胞系具有專屬的轉染方案,提高靶標編輯的效率。


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